الاثنين، 21 نوفمبر، 2016

العدد الكلي لكريات الدم الحمراء و البيضاء

العدد الكلي لكريات الدم الحمراء و البيضاء

هناك طريقتين لعد الخلايا، أما باستخدام جهاز خاص لعد الخلايا اوتوماتيكيا أو باستخدام طريقة العد العادية.   جهاز عد الخلايا الاوتوماتيكي يعمل عن طريق عد الخلايا التي تمر من خلال فتحة مناسبة لحجم الخلايا المعدودة.  يمكن التحكم في حجم هذه الفتحة حسب حجم الخلايا الخاضعة للعد.  أما في طريقة عد الخلايا العادية، يجب أولا تخفيف كمية من الدم و من ثم تعد الخلايا بطريقة خاصة تسمى Neubauer haemocytometer .  تحتوي هذه على حجم معين من الدم المخفف.  هذه الفحوص تتطلب خبرة و مهارة للحصول على نتائج جيدة.  في الوقت الحالي، اذا كان هناك حاجة الى هذه النوعية من الفحوصات، يفضل أن ترسل الى المختبرات الخارجية المختصة.
تطبق نفس الاجراءات عند الحاجة الى فحوص بيوكيميائية (ما عدا فحص تركيز البروتين الكلي)، حيث يتم ارسالها ايضا الى المختبرات الخارجية المختصة.
فحوصات البراز:
يعطي فحص البراز معلومات هامة عن صحة الجهاز الهضمي.  تؤخذ عينات البراز عادة من  المستقيم أو من البراز الطازج.  يجب أن تفحص العينات خلال ساعتين من جمعها.  أذا لم تتوفر الظروف لعمل ذلك، فيجب وضع العينة في عبوة خاصة ذا حجم مناسب و توضع في الثلاجة.  العبوات المستخدمة لحفظ عينات البراز تشمل الزجاجات ذات الغطاء اللولبي، عبوات بلاستيكية ذات غطاء، الكفوف أو الاكياس البلاستيكية.  لمنع فقس بيض الطفيليات التي قد تحتويها العينة، يجب أن تحتوي العبوة على اقل كمية ممكنة من الهواء عن طريق تعبئتها بشكل كامل بالعينة.  أو يمكن اضافة ضعف حجم العينة من المحلول الملحي لحفظ العينة و منع تفقيس بيض الطفيليات. 
فحص البراز الأولي:
الخطوة الاولى في الفحص تشمل فحص قوام البراز، لون العينة و رائحتها، وجود بيوض الديدان أو المواد الغريبة مثل البلاستيك.
لطخة البراز (فحص مباشر) (فحص نوعي):
تمثل هذه طريقة سريعة و سهلة لفحص البراز من ناحية نوعية فقط.  هذا الفحص يسهل اكتشاف بيوض الطفيليات اذا كانت الأصابة شديدة.

المعدات:

·   عينة براز طازجة.
·   ماء او ماء مملح.
·   سلايد و غطاء خاص.
·   أداة لبسط البراز spatula .
·   مناديل و كفوف خاصة للاستعمال لمرة واحدة.

الطريقة المتبعة:

1)   ضع بعض قطرات من الماء أو الماء المملح على السلايد.
2)   امزج كمية صغيرة من البراز باستخدام الأداة الخاصة (أزل أي مواد لا يمكن بسطها).
3)   غطي السلايد بالغطاء الخاص.
4)   افحص السلايد بالمجهر تحت التكبير الصغير (40 x ).

فحص التعويم في أنبوب المختبر (فحص نوعي):
هذا الفحص يكشف عن بيوض ال cestode و coccidian oocycts .  تكمن أهمية هذا الفحص في الكشف الأولي عن أنواع الطفيليات في العينة.

المعدات:

·   كوز/كأس كيميائي أو أناء بلاستيكي.
·   مصفاة معدنية (مثلا مصفاة الشاي) أو مصفاة من القماش.
·   مقياس measuring cylinder .
·   أداة للتحريك.
·   أنبوب مختبر.
·   مسند مختبر.
·   مجهر.
·   سلايد مع غطاء.
·   ملعقة صغيرة.
·   مناديل و كفوف خاصة للاستعمال لمرة واحدة.

سائل التعويم:

محلول الملح المشبع:
ماء                              1000 ملل
ملح طعام (ملح الصوديوم)     400 جرام
(وزن نوعي =  1.2 )
محلول السكر المشبع:
ماء                              1000 ملل
سكر                     400 كمية كافية للحصول على محلول مشبع.  يحتوي المحلول المشبع على بلورات في القعر بعد التحريك لمدة 15 دقيقة.  حرك جيدا قبل الاستعمال.
(وزن نوعي =  1.12 الى 1.20)

الطريقة المتبعة:

1)   ضع تقريبا 3 جرام من البراز في الاناء البلاستيكي.
2)   أضف 50 ملل من سائل التعويم.
3)   امزج البراز مع السائل جيدا.
4)   اسكب المحلول المعلق خلال المصفاة الى أناء آخر.
5)   اسكب المحلول المعلق في أنبوب المختبر.
6)   ضع الانبوب على المسند.
7)   أضف مزيدا من المحلول المعلق بحرص و حذر الى الأنبوب بحيث يتكون سطح محدب لأعلى السائل.
8)   غط الأنبوب بحرص و حذر بالغطاء الخاص.
9)   اترك الأنبوب جانبا لمدة 20 دقيقة.
10)   ارفع الغطاء بحرص و حذر بحيث تتكون قطرة من السائل على الغطاء و انقلها فورا الى سلايد لفحصها تحت المجهر.
11)   افحص العينة تحت المجهر مستعملا التكبير الصغير.
فحص الرسوبات (فحص نوعي):
تكمن فائدة هذا الفحص في الكشف عن بيوض trematode مثل Fasciola , Gastrodiscus ).  يتضمن الفحص ترسيب هذه البيوض.

المعدات:

·   نفس المعدات المستعملة في فحص التعويم، الفرق الوحيد يكمن في استخدام ماء الحنفية بدلا من سائل التعويم.
·   في العادة يضاف محلول من methylene blue .

الطريقة المتبعة:

1)   وزن 3 جرام من البراز في الأناء.
2)   أضف 40 الى 50 من ماء الحنفية.
3)   امزج جيدا.
4)   مرر المحلول خلال مصفاة الى أناء آخر.
5)   صب المحلول المصفى في أنبوب مختبر.
6)   اترك الأنبوب جانبا لمدة 5 دقائق ليترسب.
7)   اسكب بحرص شديد السائل الصافي المتكون في اعلى الأنبوب و تخلص منه.
8)   أضف ما تبقى من الراسب الى 5 ملل من الماء و حرك.
9)   مرة أخرى و بحرص شديد اسكب السائل الصافي المتكون في اعلى الأنبوب و تخلص منه.
10)   أضف قطرة من methylene blue  الى الراسب.
11)   انقل قطرة الراسب المصبوغة الى السلايد.
12)   غطي السلايد بحرص مانعا تكون أي فقاعات هوائية.
13)   افحص العينة تحت المجهر مستعملا التكبير الصغير.
فحص McMaster (فحص كمي):
يتضمن هذا الفحص تعويم قدر معلوم من البراز في محلول مشبع من الملح أو الجلوكوز أو zinc sulphate ، و من ثم عد البيض الموجود في جهاز خاص ذا حجم معلوم.
هناك عدة فحوص كمية لتحديد عدد البيض في جرام من البراز.  قد تتضمن هذه الفحوص اساليب التعويم أو الترسيب أو كلاهما معا.  كما يستخدم جهاز خاص للعد يسمى McMaster slide .
تعتبر الطريقة المذكورة تاليا سهلة و سريعة العمل.  تكشف هذه الطريقة عن البيوض المتواجدة في العينة أذا كان هناك 50 بيضة أو أكثر في كل جرام من العينة.

المعدات:

·   جهاز خاص للعد McMaster counting chamber .
·   محلول من البراز الطازج.
·   محلول التعويم (كما سبق ذكره في فحص التعويم في أنبوب المختبر).
·   ميزان.
·   مصفاة معدنية (مثلا مصفاة الشاي) أو مصفاة من القماش.
·   مقياس measuring cylinder .
·   أناء للمزج.
·   ملعقة صغيرة.
·   حقنة.
·   مناديل و كفوف خاصة للاستعمال لمرة واحدة.
·   مجهر.
·   سلايد و غطاء.

الطريقة المتبعة:

1)   وزن 4 جرام من البراز و أضف 56 ملل من المحلول الملحي المشبع الى أناء.
2)   أمزج المحتويات جيدا باستخدام الملعقة.
3)   اسكب المحلول خلال المصفاة.
4)   امزج المحلول المصفى جيدا و أضف بعضا منه الى أحد أطراف McMaster slide .
5)   كرر الخطوة رقم 4 مضيفا المحلول الى الطرف الآخر من McMaster slide .
6)   تجنب السماح بدخول فقاعات الهواء الى McMaster slide .
7)   ضع counting chamber جانبا لمدة 5 دقائق لتعويم البيوض.
8)   افحص السلايد تحت المجهر تحت التكبير الصغير.
9)   عد العدد الكلي للبيوض المتواجدة في المنطقة المخططة في كلا chambers .  اذا وجد أكثر من نوع واحد من البيوض، فيجب أن يعد كل نوع على حدا.
لحساب عدد البيض في كل جرام من العينة (FEC) :
أن FEC = العدد الكلي للبيض x 50
تعوم بيوض الديدان الحلقية و الديدان المسطحة الى سطح المحلول في McMaster chamber .  يجب رؤية هذه البيوض لعدها، لذلك لا بد من تعديل الجهاز حتى تظهر العلامات المحددة بوضوح و من ثم العد.

في بعض مختبرات SPANA، يمكن القيام بفحوصات البراز الأخرى مثل تحضير العينات لزراعة البكتيريا و فحص Baermann لعزل طفيليات ديدان الرئة.
بيوض ديدان الخيول:

1)   Parascaris equorum
2)   Strongylus species
3)   Trichonema species
4)   Triodontophorus
5)   Anoplocephala species
6)   Gastrodiscus aegyptiacus
7)   Strodiscus westeri
8)   Dictyocaulus arnfieldi
9)   Oxyrius equi

ليست هناك تعليقات:

إرسال تعليق