الاثنين، 21 نوفمبر، 2016

العامل الروماتويدي


العامل الروماتويدي (RF)
القاعدة
يوجد العامل الروماتويدي (RF) في أمصال المرضى الذين يعانون من التهاب المفاصل الروماتويدي ويُعتقد وجود أجسام مضادة IgM موجهة ضد الغلوبولين المناعي G الموجود بالمرضى.
RF عبارة عن أدوات اختبار تراص لاتيكس السريع لاكتشاف وجود (RF) في المصل البشري. تغطى جسيمات لاتيكس RF باستخدام جاما غلوبولين المطهر خصيصا، عند خلط مستعلق اللاتيكس مع المصل الذي يحتوي على مستويات RF مرتفعة على الشريحة، يلاحظ وجود تراص خلال دقيقتين.  يتمتع RF بحد كشف يبلغ 8 وحدة دولية/مجم من RF  في مصل المريض.
المادة
1-     مستعلق جسيمات لاتيكس البوليستيرين (حوالي 1.25%) مغطى بكسر IgG المعدل بطريقة مناسبة في دارئة الثبات.
2-     عنصر التحكم الإيجابي. المصل المحتوي على أجسام مضادة للعامل الروماتويدي. قوة العمل.
3-     عنصر التحكم السلبي. المصل الخالي من أجسام مضادة للعامل الروماتويدي.
4-     محراك
5-     شريحة بلاستيكية
6-     الممصات الدقيقة قادرة على توزيع 50 ميكرو لتر.
7-     محلول ملح مساوي التوتر (0.9% NaCI)
جمع العينات وتحضيرها
 الحصول على عينة من الدم الوريدي من المريض وترك الجلطة تتكون وتنكمش. قم بالطرد المركزي لعينة الدم المتخثر واحصل على مصل واضح. يتطلب عينات مصل جديدة.
لا تستخدم في الاختبار المصل الذي به انحلال الدم أو الملوث أو الدهني حيث أن ذلك سيؤثر عكسيًا على النتائج.
يخزن المصل في درجة حرارة تتراوح من 2 إلى 8 درجات مئوية لمدة 48 ساعة قبل الاختبار. إذا لزم التخزين لمدة أطول، يخزن في درجة حرارة تبلغ –20 درجة مئوية لمدة 6 أسابيع. يتعين خلط العينات المذابة قبل الاختبار.
لا تقم بتكرار عملية إذابة المتجمد من العينات حيث أن ذلك يتسبب في الحصول على نتائج كاذبة.
تحضير الكاشف
تحضر جميع الكواشف عند درجة حرارة الغرفة (من 20 درجة إلى 25 درجة مئوية) وتُخلط برفق قبل الاستخدام. لا تحدث الرغوة.
ينبغي تنظيف شريحة الاختبار تنظيفا جديدا قبل الاستخدام حيث أن آثار المنظف أو العينة السابقة قد تؤثر على النتيجة.
إجراء التنظيف الموصى به:
1-     يتعين غمس البطاقات المستخدمة في محلول مطهر. اتبع مبادئ الجهاد المصنعة للمواد المطهرة.
2-     يتعين فرك دوائر التفاعل بمادة غير أكالة لضمان إزالة الجسيمات اللاصقة الممكنة.
3-     اشطف تمامًا بماء مطهر.
4-     اترك بطاقة التفاعل لتجف.
5-     قم برش البطاقات بمحلول كحولي بنسبة 70%.
6-     اترك الكحول ليتبخر قبل إعادة الاستخدام.
إجراء المقايسة
طريقة وصفية
1. اترك كواشف الأدوات ومصل المريض ليصل إلى درجة حرارة الغرفة.
2. انقل 50 ميكرولتر من مصل المريض إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3. قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4. اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5. برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
طريقة شبه كمية
1. باستخدام محلول ملح مساوي التوتر، قم بتحضير مخففات تسلسلية لمصل المرضى (1/2، 1/4، 1/8، 1/16، 1/32، 1/64 وغيرها)
2. انقل 50 ميكرولتر من كل مخففات المصل إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3. قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4. اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5. برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
النتائج والتفسير
افحص شريحة الاختبار تحت مصدر ضوء قوي بعد دقيقتين. من خلال دور اختبار، يتعين اختبار عناصر تحكم الأدوات وعينات قيم المستوى المعروفة. من المفترض أن يعطي عنصر التحكم السلبي للأدوات  نتيجة سلبية بعد دقيقتين. من المفترض أن يعطي عنصر التحكم الإيجابي للأدوات نتيجة إيجابية عند العيار 1/4 +/- مخفف واحد مزدوج بعد دقيقتين. إن لم تعط مستويات عناصر التحكم أو عينات المستخدمين المعروفة النتائج المتوقعة، يتعين اعتبار نتائج الاختبار غير صالحة.
طريقة وصفية
النتيجة الإيجابية يشار إليها من خلال نمط تراص واضح للاتيكس، في محلول واضح. النتيجة السلبية يشار إليها من خلال عدم وجود تغير في مستعلق اللاتيكس على شريحة الاختبار.
يتم الحصول على النتائج الإيجابية عندما يبلغ تركيز مصل RF 8 وحدة دولية/ملليلتر أو أكثر وتكون النتائج السلبية عندما يكون تركيز RF أقل من 8 وحدة دولية/ملليلتر.
طريقة – شبه كمية
بعد ذلك، يحسب تركيز RF بالمصل بالتقريب من خلال مضاعفات عامل المخفف (أي 2 أو 4 أو 8 أو 16) أو من خلال حد الكشف وهو 8، لتعطي قيمة تركيز تبلغ وحدة دولية/ميكرولتر، على سبيل المثال إذا كان عيار التراص عند 1/8، فإن القيمة التقريبية لتركيز RF بالمصل تكون 8 × 8  = 64 وحدة دولية/ميكرولتر.
تم الكشف عن عيارات بقيمة 1074 وحدة دولية/ميكرولتر من خلال Avitex RF مع عدم وجود تأثير للبروزون (الصنارة)..


اختبار البروتين التفاعلي سى (CRP)
القاعدة
البروتين التفاعلي سى (CRP) الموجود في أمصال المريض وجد مرتبطا بحالات الإصابة الحادة والحالات النخرة ومجموعة من الاضطرابات الالتهابية. هناك ارتباط بين مستويات مصل CRP وبداية العملية الالتهابية. مراقبة مستويات CRP في أمصال المريض تشير إلى فاعلية العلاج وتقييم تعافي المريض.
تغطى جسيمات لاتكس CRP بالأجسام المضادة إلى CRP البشري. عند خلط مستعلق اللاتكس بالمصل الذي يحتوي على مستويات CRP مرتفعة على الشريحة، يلاحظ وجود تراص واضح خلال دقيقتين.

 المادة
1-     يغطى مستعلق جسيمات لاتيكس البوليستيرين (حوالي 1%) بأجسام مضادة إلى CRP.
2-     عنصر التحكم الإيجابي. المصل يحتوي على أجسام مضادة إلى CRP.
3-     عنصر التحكم السلبي. مصل خالٍ من أجسام مضادة إلى CRP.
4-     محراك 
5-     شريحة بلاستيكية 
6-     ممصات صغيرة قادرة على توزيع 50 ميكرولتر.
7-     محلول ملح مساوي التوتر (0.9% كلوريد الصوديوم)

تحضير الكاشف
تحضر جميع الكواشف عند درجة حرارة الغرفة (من 20 درجة إلى 25 درجة مئوية) وتخلط برفق لإعادة تعليق اللاتيكس قبل الاستخدام. لا تحدث الرغوة.
ينبغي تنظيف شريحة الاختبار تنظيفًا جيدًا قبل الاستخدام حيث أن آثار المنظف أو العينة السابقة قد تؤثر على النتيجة.
إجراء التنظيف الموصى به:
1. يتعين غمس البطاقات المستخدمة في محلول مطهر. اتبع مبادئ الجهاد المصنعة للمواد المطهرة.
2. يتعين فرك دوائر التفاعل بمادة غير أكالة لضمان إزالة الجسيمات اللاصقة الممكنة.
3. اشطف تمامًا بماء مطهر.
4. اترك بطاقة التفاعل لتجف.
5. قم برش البطاقات بمحلول كحولي بنسبة 70%.
6. اترك الكحول ليتبخر قبل إعادة الاستخدام.
الإجراء
طريقة وصفية
1. اترك كواشف الأدوات ومصل المريض ليصل إلى درجة حرارة الغرفة.
2. انقل قطرة واحدة (50 ميكرو لتر) من مصل المريض إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3. قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4. اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5. برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
طريقة شبه كمية
1. باستخدام محلول ملح مساوي التوتر، قم بتحضير مخففات تسلسلية لمصل المرضى (1/2، 1/4، 1/8، 1/16، 1/32، 1/64 وغيرها)
2. انقل قطرة واحدة (50 ميكرولتر) من كل مخففات المصل إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3. قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4. اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5. برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
النتائج والتفسير
افحص شريحة الاختبار تحت مصدر ضوء قوي بعد دقيقتين. من خلال دور اختبار، يتعين اختبار عناصر تحكم الأدوات وعينات قيم المستوى المعروفة. من المفترض أن يعطي عنصر التحكم السلبي للأدوات نتيجة سلبية بعد دقيقتين. من المفترض أن يعطي عنصر التحكم الإيجابي للأدوات نتيجة إيجابية عند العيار 1/4 +/- مخفف واحد مزدوج بعد دقيقتين. إن لم تعط مستويات عناصر التحكم أو عينات المستخدمين المعروفة النتائج المتوقعة، يتعين اعتبار نتائج الاختبار غير صالحة.
طريقة وصفية
النتيجة الإيجابية يشار إليها من خلال نمط تراص واضح للاتيكس، في محلول واضح. النتيجة السلبية يشار إليها من خلال عدم وجود تغير في مستعلق اللاتيكس على شريحة الاختبار.
أدوات لاتيكس CRP تتمتع بحد كشف يبلغ 6 ملجم/لتر من CRP في مصل المريض. يحصل على النتائج الإيجابية عندما يكون تركيز مصل CRP أعلى من 6 ملجم/لتر ويحصل على النتائج السلبية عندما يكون التركيز 6 ملجم/لتر أو أقل.
طريقة شبه كمية
بعد ذلك، يحسب تركيز CRP بالمصل بالتقريب من خلال مضاعفات عامل المخفف (أي 2 أو 4 أو 8 أو 16) أو من خلال حد الكشف وهو 6، لتعطي قيمة التركيز بوحدة ملجم/لتر، على سبيل المثال إذا كان عيار التراص عند 1/8، فإن القيمة التقريبية لتركيز CRP بالمصل تكون 6 × 8  = 48 ملجم/لتر.
تم الكشف عن عيارات بقيمة 500 ملجم/لتر من خلال CRP مع عدم وجود تأثير للبروزون (الصنارة).


اختبار تراص بشريحة لاتيكس ASO
القاعدة
الأمراض العقدية شائعة عند جميع السكان ويوجد لدى نسبة كبيرة من الأشخاص أجسام مضادة ضد العقدية. تنتج العقدية الانحلالية b للفضيلة A نوعين من إنزيمات الحالة الدموية: الستربتوليزين حساس الأكسجين O والستربتوليزين ثابت الأكسجين S . الستربتوليزين المخفض (غير المؤكسد) O هو وحده المستمنع والمستخدم في الاختبار. يعتمد اختبار أضداد الحالة العقدية O على حقيقة أن المرضى الذين يعانون من الإصابة بالعقدية المقيحة(عقدية الفصيلة A) يقومون بتكوين أجسام مضادة تكبح النشاط الانحلالي للستربتوليزين O. عادة تستمر الأجسام المضادة ولا تمثل العيارات الفردية الزائدة دليلاً على وجود إصابة حالية. لا يعتبر وجود دليل على إصابة حديثة إلا حدوث ارتفاع العيار بمقدار أربع مرات أو أكبر في عينات المصل المتتالية المأخوذة على فترات يتراوح ما بينها من 10 إلى 14 يومًا. يستخدم هذا الاختبار بشكل رئيسي في تشخيص الحمى الروماتيزمية الحادة والتهاب كبيبات الكلى الحاد وغيرها من الأمراض التي تلي
العقديات.
يوجد تجاريًا نوعان من أدوات اختبار أضداد الحالة العقدية O:
يستخدم اختبار تراص بشريحة لاتيكس ASO في فحص الأمصال لتحديد المصل الذي به ارتفاع في عيارات ASO (200 وحدة دولية أو أعلى).
اختبار أنبوب ASO عبارة عن اختبار تثبيط انحلال الدم الذي يستخدم في تحديد عيار الأجسام المضادة لـ ASO  الموجود في عينات المصل التي تكون إيجابية في اختبار التراص بشريحة لاتيكس ASO. العيار الأقل من 50 وحدة دولية لا يؤكد تشخيص الحمى الروماتيزمية الحادة.
المواد والكواشف
1-     بطاقات تستخدم لمرة واحدة، مع 6 أوعية بجميعها قطارة تستخدم لمرة واحدة
2-     مصل عنصر التحكم الإيجابي
3-     كاشف لاتيكس حساس (الستربتوليزين حساس الأكسجين O)
4-     قضبان مطباق
 الإجراء
1-     تخفيف المصل بنسبة 1: 20. (أو وفقا دليل الأدوات).
2-     ضع قطرة واحدة من محلول المصل في الوعاء على البطاقة التي تستخدم لمرة واحدة.
3-     استخدم قطارة جديدة لإضافة قطرة واحدة من كاشف لاتيكس حساس.
4-     استخدم قضيب مطباق لخلط القطرتين ونشرهما خلال الوعاء بالكامل.
5-     افحص وجود تراص خلال دقيقتين.
       التفاعل الإيجابي يظهر كتراص دقيق خلال دقيقتين.
       التفاعل السلبي لا يظهر تراص.




ليست هناك تعليقات:

إرسال تعليق